С чем связан синтез липидов

Биоматериалом для молекулярно-генетических исследований методом ПЦР является  кровь с ЭДТА

1. Генетические факторы привычного невынашивания беременности и риска образования венозных тромбозов

Риск привычного невынашивания беременности может складываться из нарушений нормального функционирования как минимум трёх систем: тромбообразования, тромболизиса и синтеза половых гормонов.

Тромбофилия - патологическое состояние организма, характеризующееся повышенной склонностью к внутрисосудистому тромбообразованию вследствие врожденного, наследственного или приобретенного нарушения системы гемостаза, приводящего к утрате одной из ее основных функций - поддержания циркулирующей крови в жидком состоянии.

Тромбофилия может быть обусловлена наследственным нарушением, т.е. изменениями в генах, ответственных за поддержание гемостаза. Тромбофилия также может быть связана с физиологическими состояниями – беременностью, ожирением и с внешними причинами: хирургическими операциям, использованием гормональных контрацептивов, антифосфолипидным синдромом, повышением уровня гомоцистеина, курением или долгим периодом неподвижности. К числу наиболее распространенных генных маркеров наследственных тромбофилий относятся мутации генов протромбина, метилентетрагидрофолатредуктазы и фактора Лейдена. У многих людей с наследственной тромбофилией нет никаких симптомов (или эти симптомы проходят незамеченными), поскольку тенденция к тромбофилии недостаточно сильно выражена. Эти генетические нарушения проявляются часто только при дополнительных условиях (особенности питания, беременность, прием лекарств). Исследования последних лет показали, что наличие генетической предрасположенности к тромбофилии сопряжено с повышенным риском развития осложнений беременности (привычное невынашивание, плацентарная недостаточность, задержка роста плода, поздний токсикоз (гестоз). Полиморфизмы перечисленных генов также могут являться причиной развития венозных тромбозов.

Нарушения системы фибринолиза (лизиса и перестройки фибрина) в большинстве случаев обусловлены полиморфизмами генов PAI-1 и фактора свертывания крови XIII. Известно, что ингибирование фибринолиза часто приводит к нарушению процесса имплантации плода. В связи с этим, снижение активности данной системы является одной из причин раннего прерывания беременности. В настоящее время полиморфизм 4G гена PAI-1 обнаруживается у 82%, а полиморфизм Val34Leu фактора свертывания крови XIII у 51% женщин с регулярным невынашиванием беременности.

Эндотелиальная дисфункция также может являться причиной привычного невынашивания беременности, а также преэклампсии и эклампсии. Генетической причиной эндотелиальной дисфункции является полиморфизм гена ACE. Генотип D/D обнаруживается у 28-31% женщин, попадающих в группу риска привычного невынашивания беременности.

Повышенный уровень андрогенов (мужских половых гормонов) может быть обусловлен полиморфизмом гена CYP17, генотипы A1/A2 и A2/A2 которого соответствуют предрасположенности к невынашиванию беременности.

Наиболее полное обследование для выявления факторов невынашивания беременности и развития венозных тромбозов включает все перечисленные гены (комплекс №3 - см. прейскурант).

Исследование генетической предрасположенности к тромбофилии показано в следующих случаях:

  • Наличие в анамнезе двух и более прерываний беременности на ранних сроках;
  • Наличие в анамнезе тяжёлых осложнений беременности (гестоз, задержка развития плода, внутриутробная гибель плода);
  • Наличие родственников с тромботическими проявлениями в возрасте до 50 лет (инфаркт миокарда, ОНМК, тромбоэмболия лёгочной артерии, тромбоз глубоких вен нижних конечностей и др.);
  • Несколько неудачных попыток ЭКО;
  • Повышение уровня антифосфолипидных антител и/или гомоцистеина;
  • Планирование гинекологических оперативных вмешательств;
  • Назначение оральных гормональных контрацептивов (ОК). Женщинам с эпизодом венозной тромбоэмболии, получающим оральные контрацептивы;
  • Назначение заместительной гормональной терапии. Женщинам с эпизодом венозной тромбоэмболии, получающим заместительную гормональную терапию;
  • Курящим мужчинам в возрасте до 50 лет с эпизодом венозной тромбоэмболии;
  • Наличие тромбофлебита.

1.1 Ген: MTHFR, метилентетрагидрофолат-редуктаза.

Полиморфизм: C677T

Функция белкового продукта гена

Метилентетрагидрофолатредуктаза является основным ферментом метаболизма гомоцистеина. Гомоцистеин - продукт метаболизма метионина - одной из 8 незаменимых аминокислот организма. В норме он не накапливается. Обладает выраженным токсическим действием на клетку. Циркулируя в крови, гомоцистеин повреждает сосуды, тем самым повышая свертываемость крови и образование микротромбов в сосудах (одна из причин невынашивания беременности). Снижение активности метилентетрагидрофолатредуктазы - одна из важных причин накопления гомоцистеина в крови.

Интерпретация аллелей и генотипов

У лиц, гомозиготных по данной мутации (генотип TT), отмечается термолабильность MTHFR и снижение активности фермента примерно до 35% от среднего значения. Наличие этой мутации сопровождается повышением уровня гомоцистеина в крови. У гетерозигот это повышение выражено в меньшей степени. Повышение частоты аллеля 677T отмечено не только при позднем токсикозе (гестозе), но и при других осложнениях беременности (отслойке плаценты, задержке роста плода, антенатальной смерти плода). При беременности наличие аллеля 677T и сочетание его с другими факторами риска: мутациями гена фактора Лейдена, гена протромбина и антифосфолипидными антителами приводит к повышению вероятности раннего выкидыша.

Генотип Интерпретация
TT Значительно выраженная предрасположенность к невынашиванию беременности. Повышен риск развития венозных тромбозов.
CT Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
CC Норма

1.2 Ген: F5, фактор V свертываемости крови (лейденский фактор)

Полиморфизм: G1691А

Функция белкового продукта гена

Важным звеном каскада антикоагуляционных реакций является ограничение тромбообразования активированным протеином C. Активированный протеин C является одним из главных физиологических антикоагулянтов, ращепляющих активированные факторы свертывания V и VIII. Одной из важных причин тромбофилии является устойчивость этих факторов к разрушающему действию протеина C. Такое состояние называется резистентностью к протеину C. Главной причиной такой резистентности является лейденская мутация.

Интерпретация аллелей и генотипов

Наличие лейденской мутации повышает вероятность развития целого ряда осложнений беременности: невынашивания беременности на ранних сроках (риск повышается в 3 раза), отставания развития плода, позднего токсикоза (гестоза), фетоплацентарной недостаточности. Лейденская мутация встречается у 15% пациенток с поздними выкидышами. Было обнаружено наличие лейденской мутации у 19% пациенток с невынашиванием беременности, тогда как в контрольной группе лейденская мутация была обнаружена только у 4% женщин.
У беременных женщин – носительниц лейденской мутации повышен риск плацентарного тромбообразования. Именно тромбозы в плаценте являются причиной повышенного риска развития всех вышеперечисленных осложнений.
Дополнительными факторами риска тромбообразования являются: повышение уровня гомоцистеина, мутации гена MTHFR и гена протромбина, антифосфолипидные антитела.

генотип Интерпретация
AA Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
AG Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
GG Норма

1.3 Ген: F2, фактор II свертываемости крови (протромбин)

Полиморфизм: G20210A

Функция белкового продукта гена

Протромбин характеризует состояние свертывающей системы крови и является одним из важнейших показателей коагулограммы, Протромбин или фактор II свертывания крови – это предшественник тромбина (белка, стимулирующего образование тромба). При наличии мутации G20210A в гене протромбина обнаруживается повышенное количество химически нормального протромбина, уровень протромбина может быть в полтора-два раза выше, чем в норме.

Интерпретация аллелей и генотипов

При микротромбообразовании мутация G20210A часто встречается в сочетании с лейденской мутацией. Данная мутация является фактором риска всех осложнений, связанных с лейденской мутацией (невынашивание беременности, фетоплацентарная недостаточность, внутриутробная гибель плода, гестозы, задержка развития плода, отслойка плаценты). Мутация протромбина G20210A встречается достоверно реже во всех группах репродуктивных потерь (по сравнению с антифосфолипидными антителами, лейденской мутацией и MTHFR 677Т) и составляет соответственно 4,2% и 3% в группах ранних и поздних выкидышей.

генотип Интерпретация
AA Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
AG Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
GG Норма

1.4 Ген: F13, фактор XIII свертываемости крови

Полиморфизм: Val34Leu

Функция белкового продукта гена

Фактор XIII — фибринстабилизирующий фактор, или фибриназа участвует в образовании нерастворимого фибрина, представляющего собой основу кровяного сгустка, или тромба. Тромбы, образовавшиеся в присутствии фибриназы, очень медленно подвергаются лизису. Повышение активности фактора XIII сопровождается увеличением адгезивности и агрегации кровяных пластинок. У больных с тромбоэмболическими осложнениями активность фибриназы повышена.

Интерпретация аллелей и генотипов.

У лиц – носителей мутации 34Leu количество фибриназы соответствует показателям нормы, но активность этого фермента повышена в 2-3 раза. Мутация 34Leu наблюдается у 51% женщин с привычным невынашиванием беременности. Риск привычного невынашивания беременности еще выше у лиц – носителей мутации 34Leu в сочетании с мутацией 4G/4G в гене PAI-1.

генотип Интерпретация
Leu/Leu Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
Val/Leu Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
Val/Val Норма

1.5 Ген: PAI-1, ингибитор активатора плазминогена

Полиморфизм: 675 4G/5G

Функция белкового продукта гена

Ингибитор-1 активатора плазминогена ингибирует фибринолиз, а также является маркером воспаления. PAI -1 играет важную роль в процессе фибринолитического контроля при беременности как фактор маточно–плацентарной циркуляции. Дисбаланс маточно–плацентарного фибринолитического контроля в результате повышенной продукции PAI–1 связан не только с повышением уровня фибрина в маточных сосудах и снижением маточно–плацентарного кровотока, но также играет важную роль в снижении степени инвазии трофобласта на ранних сроках беременности. Таким образом, повышенная продукция PAI–1 создает предпосылки для развития в дальнейшем гестоза и задержки внутриутробного роста плода.

Интерпретация аллелей и генотипов

Промоторный полиморфизм 4G/5G в гене PAI-1 связан с повышением уровня PAI-1 и тромбоэмболизмом. У лиц – носителей гомозиготной формы 4G/4G-мутации отмечается повышение количества и функциональной активности тромбоцитов, и как следствие, снижение фибринолитической активности. В настоящее время гомозиготная форма 4G/4G гена PAI-1 обнаруживается у 82% - 85% женщин с привычным невынашиванием беременности.
Повышение уровня PAI–1 возможно вследствие полиморфизма 4G/4G в гене PAI–1, при СПКЯ или метаболическом синдроме.

генотип Интерпретация
4G/4G Предрасположенность к невынашиванию беременности.
Повышен риск развития венозных тромбозов.
4G/5G Норма
5G/5G Норма

1.6 Ген: АСЕ, ангиотензин-превращающий фермент

Полиморфизм: D/I

Функция белкового продукта гена

Ангиотензин-превращающий фермент (ACE) превращает неактивный ангиотензин I в ангиотензин II – одно из самых мощных биологически активных веществ, повышающих артериальное давление. Артериальная гипертензия у беременных характеризуется повышением чувствительности сосудов к ангиотензину II, а также выраженной эндотелиальной дисфункцией. Высокий уровень ангиотензин-превращающего фермента может приводить к таким состояниям, как преэклампсия и эклампсия. Преэклампсия и эклампсия является одним из наиболее опасных осложнений беременности. Частота этих осложнений составляет около 6-10% беременностей.

Интерпретация аллелей и генотипов

Риск повторного развития преэклампсии/эклампсии может быть повышенным в случае носительства полиморфизма в гене ренин-ангиотензин-альдостероновой системы АСЕ (ангиотензин-превращающего фермента).
У лиц – носителей гомозиготного генотипа D/D в гене АСЕ уровень ангиотензин-превращающего фермента в 2 раза выше, чем у носителей гомозиготного генотипа I/I. У носителей гетерозиготного генотипа I/D промежуточный уровень фермента.
Генотип D/D обнаруживается у 28-31% женщин, попадающих в группу риска привычного невынашивания беременности. При интерпретации результатов важно учитывать сочетанное взаимодействие генотипов D/D гена ACE с 4G/4G гена PAI-I, либо D/D гена ACE с Leu/Leu гена F13. При наличии единственного генотипа D/D гена ACE риск развития преэклампсии/эклампсии незначителен.

генотип Интерпретация
D/D Предрасположенность к невынашиванию беременности. Предрасположенность к развитию преэклампсии/эклампсии.
I/D Норма
I/I Норма

1.7 Ген: CYP17, 17a-гидроксилаза/17,20-лиаза

Полиморфизм: A1/A2 (5′ - C/T)

Функция белкового продукта гена

17а-гидролаза/17,20-лиаза является ключевым ферментом биосинтеза стероидных гормонов в яичниках и надпочечниках. Фермент катализирует как 17 a-гидроксилирование прегненолона и прогестерона, так и 17,20-лигирование 17a-гидроксипрегненолона и 17- a-гидроксипрогестерона (поэтому продукт экспрессии гена CYP17 известен и как 17-гидроксилаза, и как 17,20-лиаза)

Интерпретация аллелей и генотипов

В промоторной области гена CYP17 находится полиморфизм, распознаваемый рестриктазой MspAI. Рестрикция фрагментов позволяет выделить два аллеля - А1 и А2. Известно, что аллель А2 обладает усиленной скоростью транскрипции; что соответствует повышенной активности фермента и ускоренному образованию стероидов. Генотипы A1/A2 и A2/A2 соответствуют предрасположенности к невынашиванию беременности, причем с эффектом дозы гена. Риски патологии у носительниц генотипов A1/A2 и A2/A2 в сравнении с носительницами генотипа A1/A1 составляют 1,7 и 2,4, соответственно.

генотип Интерпретация
A2/A2 Значительно выраженная предрасположенность к невынашиванию беременности.
A1/A2 Предрасположенность к невынашиванию беременности.
A1/A1 Норма

 2. Генетические факторы развития гиперандрогении у женщин

2.1. Генетические факторы развития синдрома поликистозных яичников, СПКЯ

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) - заболевание, возникающее при нарушениях функции гипоталамо-гипофизарной системы, дисфункции коры надпочечников или первичном поражении яичников (нарушение биосинтеза стероидных гормонов). Постоянным симптомом данного заболевания является патология репродуктивной системы. Частота СПКЯ среди женщин репродуктивного возраста составляет от 3,5 до 7,5%.

СПКЯ характеризуется нарушениями менструального цикла, гирсутизмом и другими проявлениями вирильного синдрома, ожирением, бесплодием (преимущественно первичным) и наличием увеличенных, поликистозно-измененных яичников. Гирсутизм встречается у 45 - 60% больных, что практически всегда сочетается с повышенным уровнем андрогенов яичникового и/или надпочечникового происхождения. Практически у каждой второй больной с СПКЯ выявляются нарушения жирового обмена.

В настоящее время уже известно, что СПКЯ является одной из форм метаболического синдрома (МС). Обязательными признаками МС являются: состояние инсулинорезистентности, нарушение липидного профиля и ожирение по андроидному типу. У больных СПКЯ эти признаки сочетаются с нарушением продукции, транспорта, метаболизма андрогенов, а также повышенной чувствительности к андрогенам в тканях. Таким образом, СПКЯ – это патология эндокринной системы с нарушением метаболизма углеводного обмена в сочетании с повышенным синтезом андрогенов.

Роль генетических факторов в развитии СПКЯ.

Ключевые гены, имеющие отношение к развитию клинических проявлений СПКЯ представлены двумя основными группами.

► В первую группу включены гены, контролирующие метаболические процессы обмена глюкозы и, соответственно, состояния гиперинсулинемии и инсулинорезистентности.

Ген INS, - инсулин. При гиперинсулинемии стимулируется избыточный синтез стероидных гормонов в яичниках, преимущественно андрогенов.

Ген PPAR-γ, - рецептор, активирующий пролиферацию пероксисом (РАПП) является гормональным рецептором, регулирующим дифференциацию жировых клеток. РАПП регулирует энергетический, жировой и углеводный обмен. Высокая активность РАПП предрасполагает к развитию инсулинорезистентности.

► Во вторую группу включены гены, отвечающие за синтез, превращение в активную форму и транспорт стероидных гормонов, а также индивидуальную чувствительность тканей к андрогенам.

Ген CYP11α, - фермент, отщепляющий боковую цепь, лимитирует скорость реакции образования прегненолона из холестерина в яичниках и надпочечниках. Повышение активности гена CYP11α лежит в основе увеличенной продукции андрогенов.

Ген SHBG - глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ). Перенос андрогенов из источника их продукции к месту назначения происходит в связанном виде преимущественно с ГСПГ. При этом связанные с ГСПГ стероиды биологически не активны. Снижение уровня ГСПГ (LL-вариант полиморфизма (TAAAA)n) приводит к повышенному уровню свободного тестостерона и, соответственно, к гиперандрогении.

Ген AR, рецептор андрогенов, связывает биологически активный андроген – дигидротестостерон. При связывании рецептора с дигидротестостероном включается цепь биохимических реакций, связанных с эффектами тестостерона в андроген-зависимых тканях.

Ген SRD5A2, 5α-редуктаза тип 2А - ключевой фермент в эффектах андрогенов. Генотип Leu/Leu связан со снижением активности фермента и протективным (защитным) влиянием на развитие СПКЯ.

Изменения в структуре одного или нескольких из этих генов могут вызвать развитие тех или иных клинических симптомов (или симптомокомплексов), характерных для синдрома поликистозных яичников. Разнообразие клинических и биохимических проявлений СПКЯ объясняется взаимодействием между небольшим числом ключевых генов и внешними факторами.

Информация о генетической предрасположенности к СПКЯ позволяет врачу выявить причинно-следственные связи возникновения различных клинических проявлений СПКЯ и может быть полезна при выборе методов лечения.

Исследование генетической предрасположенности к развитию синдрома поликистозных яичников показано следующим группам лиц:

  • Женщинам с аменореей и/или ановуляторной аменореей, страдающим бесплодием.
  • Женщинам с гиперандрогенией, выявленной клинически или лабораторно.
  • Женщинам, страдающим бесплодием при исключении других причин гиперандрогении, таких как адреногенитальный синдром, синдром Иценко – Кушинга, гиперпролактинемия, андрогенопродуцирующая опухоль.
  • Женщинам репродуктивного возраста, страдающим бесплодием при наличии родственников первой степени родства с диагнозом диабет 2 типа.
  • Женщинам с метаболическим синдромом (ИМТ более 26, ОТ более 85) .
  • Женщинам с поликистозно-измененными яичниками.

2.1.1 Ген: INS, инсулин

Полиморфизм: VNTR (полиморфизм длинных повторяющихся последовательностей)

Функция белкового продукта гена

Инсулин является гормоном, секретируемым b-клетками поджелудочной железы, регулирущим метаболизм глюкозы. Избыток инсулина может значительно изменять функцию яичников. При гиперинсулинемии стимулируется избыточный синтез стероидных гормонов в яичниках, преимущественно андрогенов.

Интерпретация аллелей и генотипов

Носительство аллелей класса III в гене INS связано с увеличенным синтезом инсулина. У лиц - носителей аллелей класса III повышен риск развития абдоминального ожирения и сахарного диабета 2-го типа. Риск развития синдрома поликистозных яичников у женщин с абдоминальным ожирением или имеющим родственников 1-й степени родства с диабетом 2-го типа повышен в 8 раз.

генотип Интерпретация
III/III Предрасположенность к гиперинсулинемии
I/III Норма
I/I Норма

2.1.2 Ген: PPAR-γ, Рецептор, активирующий пролиферацию пероксисом (РАПП)

Полиморфизм: Pro12Ala

Функция белкового продукта гена

Рецептор, активирующий пролиферацию пероксисом (РАПП), является гормональным рецептором, регулирующим дифференциацию жировых клеток. РАПП регулирует энергетический, жировой и углеводный обмен. Высокая активность РАПП предрасполагает к развитию инсулинорезистентности. Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) - наиболее частое состояние, при котором наблюдается сочетание гиперандрогении и инсулинорезистентности.

Интерпретация аллелей и генотипов

Фактором риска развития инсулинорезистентности при СПКЯ является носительство генотипа Pro12Pro.

генотип Интерпретация
Pro/Pro Предрасположенность к инсулинорезистентности
Pro/Ala Норма
Ala/Ala Норма

2.1.3 Ген: CYP11α, фермент, отщепляющий боковую цепь

Полиморфизм: STR (полиморфизм коротких повторяющихся последовательностей)

Функция белкового продукта гена

Фермент лимитирует скорость реакции образования прегненолона из холестерина в яичниках и надпочечниках. Повышение активности гена CYP11α лежит в основе увеличенной продукции андрогенов.

Интерпретация аллелей и генотипов

Группа аллельных вариантов с количеством повторов 226, 236 и 241 (216R-) связана с увеличением продукции андрогенов и повышенным риском развития СПКЯ. У носителей аллельных вариантов 216R- увеличен синтез ДГЭА в яичниках.

генотип Интерпретация
216R- Предрасположенность к увеличению продукции андрогенов
216R+ Норма

2.1.4 Ген: SRD5A2, 5α-редуктаза тип 2А

Полиморфизм: Val89Leu (V89L)

Функция белкового продукта гена

Фермент α-редуктаза типа 2А катализирует превращение тестостерона в биологически активную форму дигидротестостерон. Ключевой фермент в эффектах андрогенов. Недавно было показано, что α-редуктаза типа 2А работает не только в андроген-чувствительных тканях, но и в яичниках. При интерпретации результатов анализа генетических факторов развития СПКЯ важно учитывать наличие предрасполагающих к развитию СПКЯ вариантов генов INS, PPARG, CYP11α, HSBG и AR с отсутствием «протективного» варианта гена SRD5A2.

Интерпретация аллелей и генотипов

Полиморфизм в гене стероид 5-альфа-редуктазы тип 2 Val89Leu влияет на активность фермента SRD5A2. Генотип Leu/Leu связан со снижением активности фермента и протективным (защитным) влиянием на развитие СПКЯ.

генотип Интерпретация
Leu/Leu Снижение риска развития СПКЯ
Val/Leu Нейтральный
Val/Val Нейтральный

2.1.5 Ген: SHBG, глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ)

Полиморфизм: STR TAAAA(n) (полиморфизм коротких повторяющихся последовательностей)

Функция белкового продукта гена

Перенос андрогенов из источника их продукции к месту назначения происходит в связанном виде с глобулином, связывающим половые гормоны, который синтезируется в печени. Степень биологической активности андрогенов определяется уровнем свободных андрогенов (связанные с ГСПГ стероиды биологически не активны). Одной из причин высокого уровня свободного тестостерона является снижение уровня ГСПГ, с которым связывается 65% циркулирующего в крови тестостерона. Вследствие снижения уровня ГСПГ возрастает скорость превращения андростендиона в тестостерон. Снижение уровня ГСПГ в сыворотке крови происходит при ожирении, циррозе печени, вирусных гепатитах, гипотиреозе, акромегалии и лечении кортикостероидами. Низкий уровень ГСПГ в сыворотке крови может быть обусловлен сочетанием генетических и негенетических факторов.

Интерпретация аллелей и генотипов

Полиморфизм TAAAA(n) в гене SHBG определяет уровень транскрипции гена, и, соответственно, уровня ГСПГ в сыворотке крови. При интерпретации результатов генотипирования SHBG необходимо учитывать дополнительные факторы риска развития гиперандрогении.  
Показано, что при наличии в генотипе длинных (LL) копий повторов гена SHBG уровень ГСПГ может быть снижен, если в гене AR менее 22 коротких повторов полиморфного участка (CAG)n (см. табл. с интерпретацией результатов для двух генов - SHBG и AR). 
Другим генетическим фактором риска снижения уровня ГСПГ является наличие в генотипе варианта Pro/Pro гена рецептора, активирующего пролиферацию пероксисом (PPAR-γ) в сочетании с генотипом LL SHBG. Дополнительными и независимыми факторами снижения уровня ГСПГ при генотипе LL являются высокий ИМТ (индекс массы тела) и установленный статус СПКЯ. Свободные жирные кислоты могут подавлять связывание тестостерона глобулином. Поэтому диета с преобладанием насыщенных жирных кислот в структуре липидов при генотипе LL также является фактором, влияющим на снижение уровня ГСПГ.
Однако уровень ГСПГ при генотипе LL может быть повышенным у женщин с выявленными показателями метаболического синдрома: инсулинорезистентностью, абдоминальным ожирением, нарушениями липидного обмена.
 

генотип Интерпретация
LL Предрасположенность к низкому уровню ГСПС, гиперандрогении (при наличии дополнительных генетических и негенетических факторов риска)
SS, SL Норма

2.1.6 Ген: AR, рецептор андрогенов

Полиморфизм: STR (CAG)n (полиморфизм коротких повторяющихся последовательностей)

Функция белкового продукта гена

Рецептор андрогена связывает биологически активный андроген – дигидротестостерон. При связывании рецептора с дигидротестостероном включается цепь биохимических реакций, связанных с эффектами тестостерона в андроген-зависимых тканях. Транскрипционная активность гена AR зависит от длины трехнуклеотидного повтора (CAG)n. От этой активности зависит и баланс между андрогенами и эстрогенами, а также транс-активация генов, регулирующих клеточный цикл. Показана связь между гиперандрогенией, ассоциированной с синдромом поликистозных яичников, и длиной полиморфного участка (CAG)n в гене AR.

Интерпретация аллелей и генотипов

У женщин короткие формы (меньше 22 повторов) являются дополнительным фактором риска классической (сопровождающейся повышенными значениями тестостерона) формы СПКЯ.

генотип Интерпретация
< 22R Предрасположенность к СПКЯ у женщин с повышенными значениями тестостерона
> 22R Норма

Интерпретация результатов исследований по генам SHBG и AR сложна и неоднозначна. По современным данным важно учитывать взаимное влияние полиморфизмов этих генов.

SHBG SS, SL Отсутствие предрасположенности к низкому уровню SHBG, к СПКЯ, к гиперандрогении
AR > 22R
SHBG SS, SL Отсутствие предрасположенности к низкому уровню SHBG
AR < 22R Наличие предрасположенности к СПКЯ и гиперандрогении
SHBG LL Наличие предрасположенности к гиперандрогении у женщин с метаболическим синдромом
AR > 22R
SHBG LL Наличие предрасположенности к низкому уровню SHBG, гиперандрогении, СПКЯ
AR < 22R

2.2 Генетические факторы врожденной дисфункции коры надпочечников (ВДКН)

Адреногенитальный синдром (врожденная дисфункция коры надпочечников) - спектр заболеваний, обусловленных дефектом ферментных систем, участвующих в биосинтезе стероидных гормонов надпочечников. 95% всех случаев заболеваний связано с дефицитом  21-гидроксилазы. Частота встречаемости этого ферментативного дефекта достаточно высока и составляет в среднем 1:14000 новорожденных. Поздняя диагностика, несвоевременная и некорректная терапия приводят тяжелым последствиям: гибели ребенка от сольтеряющих кризов, ошибками в выборе половой принадлежности при выраженной вирилизации наружных гениталий у девочки, нарушениям роста и полового созревания, бесплодию.

Исследование необходимо проводить в следующих группах лиц:

  • Женщины с диагнозом «замершая эмбриональная беременность»
  • Женщины с привычным невынашиванием беременности
  • Женщины с диагнозом СПКЯ неустановленной этиологии
  • Девушки пубертатного возраста с проявлениями неклассической формы ВДКН: олигоменорреей, гирсутизмом, акне и интерсексуальным типом телосложения.
  • Девочки младшего возраста с вирилизацией наружных гениталий для дифференциальной диагностики ВДКН с идиопатической врожденной вирилизацией наружных гениталий.
  • Дети младшего возраста (2-4 года) с признаками преждевременного полового созревания по мужскому типу для дифференциальной диагностики вирильной формы ВДКН с надпочечниковой недостаточностью, гермафродитизмом другого генеза, различными вариантами преждевременного полового созревания и андрогенпродуцирующей опухолью надпочечников.

Ген: CYP21, стероид-21-гидроксилаза

Полиморфизмы:

  1. наличие слитного гена CYP21P/CYP21,
  2. P30L первого экзона гена CYP21,
  3. нарушения сплайсинга второго интрона гена CYP21,
  4. D/I третьего экзона гена CYP21,
  5. I172N четвёртого экзона гена CYP21,
  6. кластер полиморфизмов шестого экзона гена CYP21,
  7. V281L седьмого экзона гена CYP21,
  8. Q318 восьмого экзона гена CYP21,
  9. R356W восьмого экзона гена CYP21,
  10. P453S десятого экзона гена CYP21.

Функция белкового продукта гена

21-гидроксилаза (р450с21) - фермент из группы цитохромов р450, участвующий в процессе биосинтеза кортизола и альдостерона, трансформирующий 17альфа-гидроксипрогестерон в 11-дезоксикортизол и прогестерон в дезоксикортикостерон. Дефицит  21-гидроксилазы приводит к недостаточной продукции кортизола, что вызывает повышение секреции АКТГ и приводит к гиперплазии коры надпочечников. Генетический дефект ферментной системы 21-гидроксилазы обуславливает приблизительно 90% случаев адреногенитального синдрома (ВДКН). Мутации в гене 21-гидроксилазы приводят к нарушению синтеза кортизола из холестерина и повышенному синтезу надпочечниковых андрогенов.

Клиническая картина ВДКН зависит от степени нарушения ферментативной активности 21-гидроксилазы, которая в свою очередь зависит от типа нарушения гена CYP21: положения мутации (см. графу «генотип» в таблице), количества мутаций и зиготности (см. ниже). Формы заболевания можно разделить по тяжести течения: сольтеряющая – тяжелая, простая вирильная – средняя, неклассическая – легкая.

При небольших дефектах гена адреногенитальный синдром может проявляться только бесплодием. Первая менструация может запаздывать или быть своевременной. Менструальный цикл нерегулярный, имеет тенденцию к задержке. Молочные железы не развиты, появляется оволосение на лице, бёдрах, по белой линии живота. Частота невынашивания беременности при адреногенитальном синдроме достигает 26%.

Интерпретация аллелей и генотипов

Делеция гена или замена гена на псевдоген приводят к полной потере ферментативной активности, проявляющейся клиникой минералокортикоидной недостаточности и выраженной вирилизацией. Наиболее частой точечной мутацией, приводящей к выраженной потере активности фермента, является мутация во 2-ом интроне (I2splice), приводящая к дефекту сплайсинга 2-го интрона (сплайсинг - удаление интронов в процессе транскрипции). Эта мутация выявляется чаще при сольтеряющей форме заболевания. Часто встречается также точечная мутация I172N (замена изолейцина на аспарагин в позиции 172), которая приводит к потере 90 - 95% активности 21-гидроксилазы и клинически проявляется вирильной формой заболевания. Точечные мутации V281L, P453S и P30L приводят к потере 50% активности фермента и могут проявляться в виде умеренной и легкой вирилизации (неклассический вариант заболевания).

Название гена Интерпретация результатов Название мутации Мутация выявлена в гомозиготном состоянии Мутация выявлена в гетерозиготном состоянии
CYP21 Слитный ген CYP21P/CYP21 Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Мутация P30L первого экзона Наличие риска развития ВДКН, неклассическая форма Если выявлена одна эта мутация, то возможно отсутствие клинических проявлений или слабовыраженные проявления
Нарушение сплайсинга
2 интрона
Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая или простая вирильная форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Делеция
3 экзона
Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая или простая вирильная форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Мутация I172N 4 экзона Наличие риска развития ВДКН, простая вирильная форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Кластер мутаций
6 экзона
Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Мутация V281L 7 экзона Наличие риска развития ВДКН, неклассическая форма Если выявлена одна эта мутация, то возможно отсутствие клинических проявлений или слабовыраженные проявления
Мутация Q318 8 экзона Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая или простая вирильная форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Мутация R356W
8 экзона
Наличие риска развития ВДКН, сольтеряющая или простая вирильная форма Если выявлена одна эта мутация, то возможны проявления незначительной вирилизации, бесплодие, невынашивание, как при неклассической форме ВДКН
Мутация P453S 10 экзона Наличие риска развития ВДКН, неклассическая форма Если выявлена одна эта мутация, то возможно отсутствие клинических проявлений или слабовыраженные проявления
Отсутствие мутаций гена CYP21 Норма

Гомозиготное состояние мутации - когда каждая из двух гомологичных хромосом несет данную мутацию. Это крайне редкие случаи.

Гетерозиготное состояние мутации - когда одна гомологичная хромосома несет ген с мутацией, а другая – нормальный, неизмененный ген. Чаще мутации обнаруживают именно в гетерозиготном состоянии.

Две и более мутации могут находиться как в одной хромосоме, так и в разных гомологичных хромосомах. Мутации, находящиеся в одной хромосоме (цис-положение), повреждают только одну копию гена, и интерпретация результата такая же, как для гетерозиготного состояния с одной мутацией.
Мутации, находящиеся в разных хромосомах (транс-положение), повреждают обе копии гена, что является причиной развития заболевания ВДКН. При наличии двух и более разных мутаций заболевание протекает по фенотипу более «лёгкой» мутации в гомозиготном состоянии (в соответствии с формой заболевания по тяжести течения: сольтеряющая – тяжелая, простая вирильная – средняя, неклассическая – легкая).
Степень клинических проявлений может значительно варьировать в зависимости от сочетаний мутаций в генотипе.
Для трактовки результата очень важно сопоставить полученные данные с клиническими проявлениями.

Нарушения сперматогенеза могут быть генетически обусловленными. В 10-15% случаев азооспермии аномалии сперматозоидов обусловлены выпадением (делецией) специальных участков Y (мужской) хромосомы. Наиболее частой генетической причиной мужского бесплодия являются мутации в локусе AZF Y-хромосомы (AZF - фактор азооспермии). Локус AZF содержит три субрегиона - AZFa, AZFb, AZFc, контролирующих сперматогенез, причем каждый из них ответствен за разные стадии этого процесса. У пациентов с микроделециями этих локусов выявлено нарушение сперматогенеза на различных стадиях, в зависимости от потери определенного участка AZF. Последствием нарушения в каждом из указанных регионов является азооспермия или олигозооспермия тяжелой степени.

Для лечения азооспермии, связанной с гормональными нарушениями, пьянством, курением, облучением и т.д. показаны одни методы лечения, а при генетически обусловленной азооспермии - совсем другие. Обнаружение генетических нарушений у пациентов позволяет избежать неадекватного в таких случаях гормонального и хирургического лечения. Рекомендовано проводить исследование AZF-локусов у всех бесплодных мужчин при концентрации сперматозоидов менее 5 млн/мл и при азооспермии.

Степень нарушения сперматогенеза зависит от положения и размера делеций, поэтому отсутствие или наличие делеций имеет прогностическое значение при лечении бесплодия методами вспомогательной репродуктивной технологии (ВРТ). Один из таких методов - экстракорпоральное оплодотворение с применением инъекции единственного сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ).

Информация о наличии делеций полезна для медико-генетического консультирования пациентов при планировании семьи, поскольку при использовании ИКСИ известны случаи передачи микроделеций Y-хромосомы от отца к ребенку мужского пола. Поэтому супружеским парам, где у отцов обнаружены делеции AZF-локусов, необходимо проводить преимплантационную диагностику с целью переноса эмбрионов женского пола.

Для диагностики генетических причин мужского бесплодия в Лаборатории «ЛАГИС» разработана ПЦР-тест-система, выявляющая генетические маркеры развития азооспермии и олигозооспермии в трех субрегионах локуса AZF. Это делеции генов, ответственных за сперматогенез. Методом ПЦР исследуется целостность локуса AZF. При делетировании хотя бы одного субрегиона локуса AZF развивается патозооспермия и обусловленное ею бесплодие.

Локусы AZF а,в,с региона длинного плеча Y-хромосомы, микроделеции Делеция локуса
AZF а
Наличие генетического маркера развития азооспермии и олигозооспермии
Делеция локуса
AZF в
Наличие генетического маркера развития азооспермии и олигозооспермии
Делеция локуса
AZF с
Наличие генетического маркера развития азооспермии и олигозооспермии
Отсутствие делеций локусовAZF а,в,с Отсутствие генетического маркера развития азооспермии и олигозооспермии

Исследование целесообразно проводить в следующих случаях:

  • Первичное бесплодие;
  • Идиопатическая патозооспермия (снижение количества сперматозоидов у мужчин при отсутствии видимых причин нарушения сперматогенеза);
  • Необструктивная азооспермия (отсутствие сперматозоидов в эякуляте);
  • Олигозооспермия тяжёлой степени (количество сперматозоидов в эякуляте 5 млн/мл и менее);
  • Наличие незрелых половых клеток (НПК) в эякуляте;
  • Генетическое обследование мужчин перед проведением ЭКО с использованием сперматозоидов, полученных от них;
  • Выявление скрытой ХХ-инверсии пола (синдром де ля Шапелля).

Список опубликованных работ, выполненных с использованием ПЦР-тест-систем, разработанных в АО «ЛАГИС»:

  1. Е.Н. Андреева, Т.В. Семичева, А.Ф. Веснина, С.А. Прокофьев, О.Н. Иванова, Е.А. Карпова, М.Ю. Кириллов, И.И. Дедов, «Молекулярно-генетические аспекты патогенеза СПКЯ», Ж. Проблемы репродукции, №6, 2007 год.
  2. Е.Н. Андреева, А.Ф. Веснина, Т.В. Семичева, Е.А. Карпова, И.И. Дедов, О.В. Черный, «Особенности клинических проявлений СПКЯ у больных с полиморфизмом в гене инсулина INS VNTP», Ж. Проблемы репродукции, №1, 2008 год.
  3. А.Ф. Веснина, Е.Н. Андреева, Т.В. Семичева, «Особенности углеводного обмена и чувствительности к инсулину у больных при генотипических отличиях по полиморфизму», сборник «Репродуктивное здоровье семьи: материалы II-ого международного конгресса по репродуктивной медицине», Москва, 2008, Курортные ведомости, №2, 2008 год.

 


Источник: http://lages-lab.ru/article_53.htm


Закрыть ... [X]

Энциклопедия БОЛЬШАЯ РОССИЙСКАЯ КУЛИНАРИЯ Вязание с крючком картинка

С чем связан синтез липидов Раздел 2 Клетка как биологическая система /
С чем связан синтез липидов Молекулярно-генетические исследования
С чем связан синтез липидов ГЛАВА 12 ПАТОФИЗИОЛОГИЯ ТИПОВЫХ
С чем связан синтез липидов АЖУРНЫЕ УЗОРЫ СПИЦАМИ. Обсуждение на
С чем связан синтез липидов Бисероплетение и рукоделие: схемы колье из бисера и бусин
С чем связан синтез липидов Болеро Вязание крючком, схемы вязания
С чем связан синтез липидов Выкройки головных уборов от Burda скачать выкройки
С чем связан синтез липидов Вышивка крестиком. Бесплатные схемы для вышивки
Вяжем летние шапочки, шляпки и панамки Занятия по экологии. Конспекты занятий, НОД по Как поэтапно нарисовать деревню карандашом? Как сшить куклу своими руками выкройки фото для начинающих Комнатные цветы. Фото и название